Laporan Fitokimia Kromatografi Kolom Cair Vacum (KCV)

Laporan Fitokimia Kromatografi Kolom Cair Vacum

BAB I

PENDAHULUAN

Laporan Partisi Fitokimia Lengkap Docx

A.   Latar belakang

Wilayah Indonesia merupakan wilayah yang sangat strategis dan baik untuk pertmubuhan tanaman taman. Hal ini dibuktikan dengan banyaknya keanekaragaman dari tumbuhan yang dapat dijumpai. Dan dari berbagai tanaman tersebut, memiliki banyak potensi untuk dijadikan obat-obat yang berasal dari alam.

Pengobatan tradisional yang menggunakan bahan-bahan alam telah sangat berkembang hingga saat ini, dan sangat menarik minat masyarakat pada umumnya untuk kembali menggunakan bahan-bahan alam sebagai obat karena mempunyai beberapa kelebihan dibandingkan dengan obat-obat sintesis. Oleh sebab itu perlu dilakukan pemisahan senyawa bermanfaat dari tamanan untuk dapat di manfaatkan secara maksimal.

Kromatografi merupakan salah satu metode pemisahan komponen-komponen campuran dimana cuplikan berkesetimbangan di antara dua fasa, fasa gerak yang membawa cuplikan dan fasa diam yang menahan cuplikan secara selektif. Bila fasa gerak berupa gas, disebut kromatografi gas, dan sebaliknya kalau fasa gerak berupa zat cair, disebut kromatografi cair

Kromatografi Suction Column atau Kromatografi Cair Vakum  adalah bentuk kromatografi  kolom yang khususnya berguna untuk fraksinasi kasar yang cepat  terhadap suatu ekstrak. Kolom  dapat berupa kolom dengan adsorben grade-KLT normal atau fase-terbalik ini relatif  bermutu dan fase gerak terhisap dengan adanya  penurunan tekanan. Fraksi biasanya dikoleksi  dengan alikuot eluen dengan satu kepolaran.

Kromatografi vakum cair dilakukan untuk memisahkan golongan senyawa metabolit sekunder secara kasar dengan menggunakan silika gel sebagai absorben dan berbagai perbandingan pelarut n-heksana : etil asetat dan menggunakan pompa vakum untuk memudahkan penarikan eluen.

Senyawa kimia yang terkandung dalam tumbuhan merupakan hasil metabolisme dari tumbuhan itu sendiri. Dari hasil penelitian banyak ahli tak jarang senyawa kimia ini memiliki efek fisiologi dan farmakologi yang bermanfaat bagi manusia. Senyawa kimia tersebut lebih dikenal dengan senyawa metabolit sekunder yang merupakan hasil dari penyimpangan metabolit primer tumuhan. Senyawa tersebut adalah golongan alkaloid, steroid, terpenoid, fenol, flavonoid, dan saponin dan antioksidan.

B.   Maksud praktikum

Adapun maksud dari praktikum ini adalah untuk mengetahui proses pemisahan senyawa kimia fraksi kasar ekstrak daun paku hata (Lygodium circinnatum) menggunakan kromatografi kolom cair vakum berdasarkan tingkat kepolaran.

C.   Tujuan praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk memisahkan senyawa kimia fraksi kasar ekstrak daun paku hata (Lygodium circinnatum) menggunakan kromatografi kolom cair vakum berdasarkan tingkat kepolaran.

  Laporan Pembuatan Media Agar Mikrobiologi Lengkap Gambar Docx

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A.    Uraian Tanaman

1.  Klasifikasi Tanaman (Integrated Taxonomic Information Syestem)

Regnum                : Plantae

Subkingdom        : Tracheobionta

Divisio                  : Pteridophyta

Kelas                     : Pteridopsida

Sub Kelas             : Schizaeatae

Ordo                       : Schizaeales

Famili                    : schizaeaceae

Genus                   : Lygodium

Spesies                : Lygodium circinatum (Burm.) Sw.

2.  Nama Lain

Daerah pasundan sering di sebut paku hata, daerah pangkep sering disebut caweng.

3.  Morfologi Tanaman ( Holtum, 1966; van Steenis & Holtum, 1982)

Rhizom menjalar dibawah permukaan tanah, rachis memanjat, rachis steril; percabangan dikotom, warna rachis hijau kecoklatan, panjang ruas rachis primer 24 cm, panjang ruas rachis sekunder 6,5 cm. Rachis fertil; percabangan dikotom, warna rachis hijau kecoklatan, cara tumbuh melilit, arah putaran kanan, panjang ruas rachis primer 13,4 cm, panjang ruas rachis sekunder 3 cm. Pinna steril; susunan pinna pada rachis oppositus jumlah pinna 1 dengan 4-5 lobus, bentuk pinna palmatus, basis attenuatus, vena bebas, apex pinna acutus, margo integer, panjang pinna 18 cm, panjang bagian basis pinna 1 cm, panjang bagian tengah pinna 15,2 cm, rasio panjang dan lebar pinna 1,18 cm. Pinna fertil; susunan pinna pada rachis oppositus, jumlah pinna 2 dengan 2 lobus, bentuk pinna palmatus, basis attenuatus, vena bebas, apex pinna acutus, panjang pinna 17 cm, panjang tangkai pinna 1 cm, panjang bagian basis 1 cm, panjang bagian tengah pinna 6 cm, rasio panjang dan lebar pinna 2,83. Spora; marginal berada di ujung pertulangan pinna.

4.  Kandungan Kimia (Jurnal Identification of Antheridiogens in Lygodium círcinnatum and Lygodium flexuosum, 1996)

Kandungan kimia yang terdapat pada paku hata ini adalah Metil ester GA_7,Me.

5.  Kegunaan Tanaman

Kegunaan paku ini yaitu batangnya untuk pembuatan tas tangan, topi, sebagai obat luka dari sengatan binatang melata seperti ular, lipan dan laba-laba yaitu dengan menggunakan getah yang terdapat pada paku ini. Juga sebagai obat luka dari sengatan binatang air yaitu dengan cara menumbuk halus daunnya.

B.   Teori Umum

Istilah kromatografi mula-mula ditemukan oleh Michael Tswett (1908), seorang ahli botani Rusia. Nama kromatografi diambil dari bahasa Yunani (chromato = penulisan dan grafe = warna). Kromatografi berarti penulisan dengan warna. Kromatografi adalah cara pemisahan campuran yang didasarkan atas perbedaan distribusi dari komponen campuran tersebut diantara dua fase, yaitu fase diam (stationary) dan fasa bergerak (mobile). Fasa diam dapat berupa zat padat atau zat cair, sedangkan fasa bergerak dapat berupa zat cair atau gas (Yazid, 2005).

Kromatografi Suction Column and Vacuum liquid chromatography (VLC) atau kromatografi cair vakum (KCV) adalah bentuk kromatografi kolom yang khususnya berguna untuk fraksinasi kasar yang cepat terhadap suatu ekstrak. Kondisi vakuma adalah alternatif untuk mempercepat aliran fase gerak dari atas ke bawah. Metode ini sering digunakan untuk fraksinasi awal dari suatu ekstrak non-polar atau ekstrak semipolar (Raymond, 2006).

Suction coloumn merupakan alat kromatografi yang merupakan modifikasi kromatografi kolom serapan. Prinsip pemisahannya sama dengan kromatografi kolom serapan. Bedanya terletak pada adanya isapan pompa vakum di bagian bawah kolom ini. Alat ini dirancang mengingat pada kromatografi kolom serapan yang pengerjaannya memakan waktu yang cukup lama. Prinsip pemisahan komponen kimia berdasarkan adsorpsi dan partisi serta dipercepat dengan isapan pompa vakum. Seperti halnya kromatografi kolom serapan, senyawa yang akan dipisahkan dilarutkan dengan pelarut yang cocok kemudian dimasukkan dalam kolom isap, selanjutnya ditambahkan eluen, eluen yang mengalir turun yang disebabkan oleh isapan pompa vakum. Hasil pemisahan ditampung dalam setiap fraksi. Volume penampungan 25 ml/fraksi dan untuk berat sampel q 10 - 30 gram volume penampungan 50 ml/fraksi. Adsorben yang digunakan sedikit lebih berbeda yaitu 35 gram silica gel 7733 dan 10 gram silika gel 7731 (Gritter, 1991).

Fasa diam yang digunakan dikemas dalam kolom yang digunakan dalam KCV. Proses penyiapan fasa diam dalam kolom terbagi menjadi dua macam, yaitu (Sarker , 2006):

a.  Cara Basah

Preparasi fasa diam dengan cara basah dilakukan dengan melarutkan fasa diam dalam fase gerak yang akan digunakan. Campuran kemudian dimasukkan ke dalam kolom dan dibuat merata. Fase gerak dibiarkan mengalir hingga terbentuk lapisan fase diam yang tetap dan rata, kemudian aliran dihentikan.

b.  Cara kering

Preparasi fasa diam dengan cara kering dilakukan dengan cara memasukkan fase diam yang digunakan ke dalam kolom kromatografi. Fase diam tersebut selanjutnya dibasahi dengan pelarut yang akan digunakan.

Manfaat dari kromatografi ini yaitu menentukan ciri senyawa aktif penyebab efek racun atau efek yang bermanfaat, yang ditunjukkan oleh ekstrak tumbuhan kasar bila diuji dengan sistem biologi. Dalam hal ini kita harus memantau cara ekstraksi dan pemisahan pada setiap tahap, yaitu untuk melacak senyawa aktif tersebut sewaktu dimurnihkan. Kadang-kadang keaktifan hilang selama proses fraksinasi akibat ketidakmantapan senyawa itu, dan akhirnya mungkin saja diperoleh senyawa berupa kristal tetapi keaktifan seperti yang ditunjukkan oleh ekstrak asal (Harborne, 1987).

1. Laporan Pembuatan Senyawa Alkana Lengkap Docx

BAB III

METODE PRAKTIKUM

A.   Alat

Adapun alat yang digunakan yaitu batang pengaduk, botol you C, gelas kimia, gelas ukur,  kolom kaca, pipa kapiler, pipet tetes, pompa vakum, statif,  dan timbangan analitik.

B.   Bahan

Adapun bahan yang digunakan yaitu aluminium foil, ekstrak daun paku hata (Lygodium circinnatum), etil asetat, kertas saring,  metanol, n-heksan, silica gel kasar dan halus, dan tissue.

C.   Prosedur Kerja

a.  Penyiapan Sampel

Kolom dibersihkan dan dibilas dengan menggunakan metanol. Dimasukkan silika gel kasar dan halus dengan perbandingan 30:10 ke dalam kolom dan dimampatkan. Setelah itu, dipasang tegak lurus pada statif. Kemudian dimasukkan n-heksan ke dalam kolom agar  diperoleh kerapatan yang maksimal. Dan dimasukkan kertas saring dan ditempatkan diatas silika.

b.  Isolasi Sampel

Ekstrak ditimbang sebanyak 1 gram. Kemudian ditambahkan sedikit campuran silika kasar dan halus (30:10) dan dicampur hingga homogen. Setelah itu dimasukkan ke dalam kolom, dan diletakkan di atas kertas saring. Dimasukkan eluen 10 : 0 ke dalam kolom. Kemudian dinyalakan pompa vakum. Ditampung fraksi di dalam botol you C.  Dimasukkan lagi eluen 9 :1 sampai eluen 0 : 10, dan ditampung fraksi didalam botol you C.

Laporan Penanganan Hewan Percobaan Lengkap Docx

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Dari praktikum Kromatografi Kolom Cair Vakum didapatkan hasil sebagai berikut :

a.  Berdasarkan eluen

Fraksi	Fase gerak ( eluen )	Warna
1.	n-heksan (10) : etil asetat (0)	Bening
2.	n-heksan (9) : etil asetat (1)	Bening
3.	n-heksan (8)  : etil asetat (2)	Kuning muda
4.	n-heksan  (7) : etil asetat (3)	Kuning
5.	n-heksan  (6) : etil asetat (4)	Hijau lumut
6.	n-heksan  (5) : etil asetat (5)	Hijau
7.	n-heksan  (4) : etil asetat (6)	Hijau lime
8.	n-heksan  (3) : etil asetat (7)	Hijau kekuningan
9.	n-heksan  (2) : etil asetat (1)	Hijau kekuningan
10.	n-heksan (1) : etil asetat (9)	Hijau kekuningan
11.	n-heksan (0) : etil asetat   (10)	Hijau kekuningan

Kromatografi kolom cair vakum merupakan kromatografi kolom yang khususnya berguna untuk fraksinasi kasar yang cepat terhadap suatu ekstrak. Kondisi vakum merupakan alternatif untuk mempercepat aliran fase gerak dari atas ke bawah.

Prinsip kromatografi kolom cair vakum pada umumnya sama dengan prinsip kromatografi lainnya yaitu adsorbsi dan partisi, hanya saja KCV ini menggunakan pompa vakum untuk mempercepat fraksinasi. Tujuan dilakukannya percobaan ini adalah untuk mendapatkan dan memisahkan kandungan senyawa kimia dalam tanaman dari fraksi daun paku hata (Lygodium circinnatum) dengan menggunakan kromatografi kolom cair vakum berdasarkan tingkat kepolaran.

Adapun  proses pengemasan silika dibuat dalam cara kering dengan perbandingan silika kasar dan silika halus yaitu 30 : 10 dengan tujuan agar silica halus dapat menutupi rongga-rongga pada silica kasar sehingga memperlama waktu kontak eluen dengan silika dan saat fraksi melewati fase diam pemisahannya lebih baik. Kombinasi antara silica halus dan silica kasar agar memudahkan dalam pemisahan dan penyerapan.

Pengemasan kering dilakukan dengan cara memasukkan 30 gram silika kasar kedalam kolom yang telah dimasukkan kaca masir pada kolom primer, dan pada kolom sekunder dipasangkan pompa vakum. Tujuan dibuat vakum pada kolom agar eluen yang berkontak pada silika dapat dengan cepat turun melewati silika menuju kolom sekunder. Setelah itu dimasukkan kertas saring, setelah itu dimasukkan 1 gram fraksi daun paku hata (Lygodium circinnatum) lalu dimasukkan eluen mulai dari perbandingan 10 : 0 sampai 0:10. Digunakan eluen dengan perbandingan 10:1 – 0:10 karena kita mau melihat tingkat dari kepolarannya. Alasan penggunaan eluen dengan tingkat kepolaran yang rendah terlebih dahulu dimasukkan ke dalam kolom yaitu karena jika yang dimasukkan terlebih dahulu adalah pelarut polar maka ditakutkan senyawa non polar pada sampel akan tertarik juga sementara kita akan melakukan proses pemisahan antara senyawa polar dan polar. Dan pada akhir dari proses isolasi tidak ada lagi senyawa non polar yang akan ditarik jika pelarut non polar digunakan lebih akhir.

Pada hasil praktikum yang kita lakukan menggunakan eluen dan ditampung dalam botol you C yang digunakan untuk menampung hasil fraksinasi (fraksi). Sehingga diperoleh fraksi yang dipisahkan berdasarkan tingkat kepolaran dari masing-masing eluen dengan perbandingan yang berbeda-beda didapatkan 11 fraksi yaitu eluen 10:0 berwarna bening, eluen 9:1 berwarna bening, eluen 8:2 berwarna kuning muda, eluen 7:3 berwarna kuning, eluen 6:4 berwarna hijau lumut, 5:5 berwarna hijau, eluen 4:6 berwarna hijau lime, eluen 3:7 berwarna hijau kekuningan, eluen 2:8 berwarna hijau kekuningan, eluen 1:9 berwarna hijau kekuningan, dan eluen 0:10 berwarna hijau kekuningan. Perbedaan warna pada masing-masing fraksi dikarenakan perbedaan kepolaran dari masing-masing senyawa yang terkandung dalam fraksi daun paku hata (Lygodium circinnatum), sedangkan tingkat kepekatan warna disebabkan banyaknya senyawa yang ditarik.

 Laporan Penentuan Spektrum Kerja Antibiotik Lengkap Docx

BAB V

PENUTUP

A.   Kesimpulan

Dari hasil praktikum yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa isolasi pada daun paku hata (Lygodium circinnatum) menggunakan kromatografi kolom cair vakum berdasarkan tingkat kepolaran diperoleh 11 fraksi.

B.  Saran

Diharapkan agar bahan dan alat yang akan digunakan dapat disediakan oleh laboratorium.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2017, Penuntun dan Buku Kerja Praktikum Fitokimia II, Fakultas Farmasi, Universitas Muslim Indonesia, Makassar.

Gritter J.R, dkk., 1991, Pengantar Kromatografi, Penerbit ITB, Bandung.

Harborne, J.B, 1987,Metode Fitokimia, ITB, Bandung.

Integrated Taxonomic Information System, 2016, Lygodium circinnatum, Diakses tanggal 20 oktober 2016.

Raymod G. Reid and Satyajit D. Sarker, 2006, Isolation of Natural Products by Low-Pressure Colomn Chromatography. In Sarker, SD., Latif, Z., and Gray, AI. (Ed), Natural Produts Isolation, Humana Press Inc. Totowa, New Jersey.

Sarker, SD., Latif, Z and Gray, Al., 2006, Natural Product Isolation, Humana Press inc, Totowa New jersey.

Yazid, E., 2005, Kimia Fisika untuk Paramedis, Andi, Yogyakarta.

GAMBAR

 

hasil ekstraksi soklet

ekstraksi soklet

Sekian Laporan Fitokimia Kromatografi Kolom Cair Vacum (KCV) mohon maaf bila ada kesalahan dalam kata dan penulisan terimakasih telah berkunjung dalam site Laporan Kromatografi Kolom Cair Vacum Lengkap semoga dapat bermanfaat.

“Tersenyumlah, karena bisa jadi dengan senyumanmu banyak orang lain yang ikut tersenyum sama sepertimu.”

Baca Juga :

1. Laporan Isolasi Hespiridin Dari Kulit Buah Jeruk Lengkap Docx
2. Laporan Isolasi Mikroorganisme Lengkap Docx
3. Laporan MIC Padat Mikrobiologi Lengkap
4. Laporan Mikromeritik Farmasi Fisika Lengakap Docx

Share this post